背景丹参(Lamiaceae)是用于治胸痹症、心绞痛的传统中药。瞬时受体电位通道1 (Transient receptor potential canonical channel 1, TRPC1)是心肌损伤治疗的重要靶点。目的筛选丹参中作用于TRPC1的活性成分。材料与方法采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)，参照Lipinski的五法则，检索丹参化合物库进行初步筛选。然后，以TRPC1蛋白为基础，用AutoDock Vina软件对化合物组进行综合评分。利用表面等离子体共振(SPR)测定了最佳化合物与TRPC1蛋白的亲和力。采用Western blot方法观察最佳化合物对HL-1细胞TRPC1蛋白表达的影响，采用Fura-2/AM检测观察最佳化合物对HEK293细胞钙离子内流的影响。结果：同源建模TRPC5蛋白是TRPC家族成员，已知有蛋白晶体结构。TRPC1与TRPC5相似度46.33%。研究者以TRPC5晶体结构为基础，作了TRPC1的同源建模；利用POCASA预测了TRPC1蛋白的活性口袋。图1  POCASA预测TRPC1蛋白活性口袋。紫域代表潜在活性位点虚拟筛选&分子对接采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)，参照Lipinski的五规则【分子量小于500Da；不超过5个氢键供体；不超过10个氢键受体；辛醇-水分配系数（Clog P）不超过5；口服生物利用度大于50%】以及类药性大于0.18，检索丹参化合物库进行初步筛选，从202个化合物中发现有20个化合物有良好的特征参数。然后利用AutoDock Vina软件对这20个化合物进行计算；通过配体受体间形状匹配与结合能量等参数进行评分。分子对接结果显示，其中迷迭香酸（Rosmarinic acid）得分最高。图2  RosA 与 TRPC1分子对接图谱亲和力测定小分子化合物RosA与TRPC1蛋白是否会发生结合呢？研究者采用SPR技术，利用P4SPR分子互作仪对RosA与TRPC1蛋白作了结合验证以及亲和力测量。检测发现，RosA与TRPC1蛋白的亲和力KD值为1.27uM；同时对照组TRPC1蛋白与TRCP1抗体的KD值是0.05 uM；TRPC1蛋白与抑制剂SKF96365的KD值是200uM。结果显示RosA可直接结合于TRPC1蛋白。图3  RosA与TPPC1蛋白的SPR结合曲线活性评价研究者进一步采用Western blot方法观察最佳化合物RosA对HL-1细胞TRPC1蛋白表达的影响，RosA (50uM)可降低HL-1细胞氧-葡萄糖剥夺/再灌注(OGD/R)后TRPC1蛋白水平(417.1%)，而对正常组没有影响。图4  RosA抑制HL-1细胞OGD/R 损伤后TRPC1蛋白水平 TRPC1蛋白属于离子通道蛋白家族，研究者又采用Fura-2/AM方法检测观察最佳化合物RosA对HEK293细胞钙离子内流的影响，发现RosA可抑制HEK293细胞中TRPC1蛋白介导的Ca2+内流损伤(0.07 Fura-2 Ratio340/380)。图5  RosA抑制HEK293细胞中TRPC1蛋白介导的Ca2+内流讨论与结论研究者利用“同源建模-虚拟筛选-分子对接-亲和力测定-活性评价”的方法，从传统中药丹参化合物库中获得了作用于TRPC1的潜在活性成分RosA，推测RosA可能是一种有前景的心肌损伤治疗临床候选药物。 文中“亲和力测定”环节采用了P4SPR个人型分子互作P4SPR优势Affinité instruments 的 P4SPR 是一款模块化、个人型的多通道分子互作系统，既可用于生物学机制的解析，也可用于药物筛选的验证。它的模块化设计允许与液流传输系统轻松集成。多通道特性提高了测量精度，其灵敏度允许检测低分子量的小分子。特异性强、灵敏度高且用户友好的P4SPR 系统可以用于快速收集SPR 数据来表征两分子间结合的相互作用，非常适合用于对生物功能背后作用机制的探索以及药物筛选等研究。 参考文献1,A CD36 ectodomain mediates insect pheromone detection via a putative tunnelling mechanism, Nature Communications,Richard Benton etc.2, Screening of rosmarinic acid from Salvia miltiorrhizaeacting on the novel target TRPC1 based on the‘homology modelling–virtual screening–molecular docking–affinity assay–activity evaluation’ method, PHARMACEUTICAL BIOLOGY.

　　关于我们普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司，成立于2012年，坐落于中关村科技园丰台园区，是致力于生命科学实验室整体解决方案的高新技术企业，代理国际多家领先的科研仪器和试剂的全国代理商。目前为止产品涵盖流式细胞术解决方案、分子生物学产品、 PCR试剂等常规实验室试剂。代理国际知名品牌40多家，并且自主研发多款生物学试剂和细胞培养基，目前无血清间充质干细胞培养基、上皮细胞培养基、流式抗体、SPR技术服务与试剂等众多产品与国内多所科研单位已达成长期合作。 为什么选择普瑞麦迪01 产品线丰富：独家代理国际知名品牌40多家，并有多款自主研发产品重点产品品牌展示02 产品客户粘性强、满意度高：多款产品均与国内多所科研单位与企业达成合作，倍受好评03 强大的团队保障：售前售后团队均为硕士学历以上，及时提供全方位的支持 合作优惠政策*优质产品高质量供应：供应多种类、满足上下游应用的高质量产品*优惠的经销政策：为签约经销商提供充足的利润空间*多维度市场支持：从宣传物料、促销活动、市场宣传活动等多维度支持经销商的市场工作*无忧的售前售后服务：强大高学历支持团队随时提供售前售后服务 合作要求*熟悉区域内的生物科研市场，有稳定客户资源*具备良好商业信誉和商业道德的公司*具有区域市场操作经验，较强的市场开发能力*生物试剂行业优先 品牌目录

　　现代细胞研究的进展离不开单细胞分析的支持。在微生物学、免疫肿瘤学以及药物发现等领域，温和地将单个细胞从细胞基质中解离出来，是进行准确的单细胞分析的前提条件。在这个方向上，OLS作为您理想的细胞研究伙伴，引以为傲地推出了TIGR全自动单细胞制备仪。这款全自动、无酶、快速和可重复的仪器，能够从组织样本中高效地获得纯净的单个细胞。TIGR全自动单细胞制备仪在OLS公司位于不来梅的实验室中得到广泛应用。它兼容标准的细胞培养耗材，例如50毫升离心管和常规的细胞过滤器，能够对组织样本进行机械解离和并行处理，从而大大缩短处理时间。      TIGR由一个台式仪器和研磨管组成，其中研磨管是一种一次性无菌耗材，内部集成了核心单元和细胞过滤器。核心单元由转子和定子插件组成，两者之间配备了对向旋转的研磨齿。TIGR的灵活性是其主要优点之一。研究人员可以调整处理参数，例如时间、旋转方向、加速度、速度和处理步骤的数量。事实上，这使得可以为每个特定的应用创建一个定制的实验协议，以满足不同研究需求。       另一个显著的优势是节省时间。使用TIGR进行解离的过程仅需不到两分钟的时间。与其他基于酶的技术相比，这大大缩短了处理时间，而其他方法可能需要长达60分钟，尤其是在需要同时处理多个样本时。TIGR全自动单细胞制备仪的亮点包括以下几个方面1.温和的样品制备：TIGR采用无酶的机械解离方法，确保对细胞样本的温和处理，避免了酶法可能引起的细胞伤害或变性。2.无酶和标准化的单细胞解离：TIGR通过机械研磨和过滤的方式，能够高效地将组织样本解离为纯净的单个细胞。这种无酶解离的方法避免了酶处理可能带来的影响，保持了细胞的完整性和生物活性。同时，TIGR采用标准化的解离过程，确保每个样本的一致性和可比性Bwin必赢，为后续的单细胞分析提供了可靠的基础。3.易于使用的软件和可定制的协议：TIGR配备了用户友好的软件界面，使操作变得简单和直观。研究人员可以根据自己的需求和实验设计，自由调整处理参数和步骤，以创建特定的实验协议。这种定制化的灵活性使得TIGR适用于各种不同的应用和实验要求。4.节省时间：TIGR的高效性可以极大地节省处理时间。相比于传统的基于酶的方法，TIGR的解离过程只需要不到两分钟的时间。这对于需要高通量处理的实验，特别是在同时处理多个样本时，具有极大的优势。研究人员可以更快地获得大量的单细胞样本，提高实验的效率和产出。5.过程控制：TIGR提供了精确的过程控制，研究人员可以调整和优化解离过程的各个参数。这种精准的控制使得实验可重复性高，能够稳定地获得高质量的单细胞样本。研究人员可以根据需要进行多次实验，得到可靠的结果。TIGR全自动细胞制备仪的原理基于研磨单元之间排列的齿的锁定机制。通过对向旋转的研磨齿，组织样本被破碎并转化为单细胞悬浮液。这种机械解离的方法简便而高效，能够提供高质量的单细胞样本，为后续的细胞分析提供可靠的基础。       总结起来，TIGR全自动细胞制备仪作为OLS公司的一款创新产品，具备温和的样品制备、无酶和标准化的单细胞解离、易于使用的软件和可定制的协议、节省时间以及精确的过程控制等多重优势。它为现代细胞研究提供了一种高效、可靠的解离方法，满足了细胞研究领域对于单细胞分析的需求。      相对于传统方法，TIGR组织研磨和解离器具有明显的优势。首先，传统方法中常使用酶来进行细胞解离，但酶的使用可能会对细胞造成损伤或变性，影响后续的分析结果。而TIGR采用无酶解离的方法，能够保持细胞的完整性和生物活性，确保获得准确的单细胞数据。      其次，传统方法中的细胞解离过程通常较为繁琐，需要耗费大量的时间和操作步骤。而TIGR的解离过程非常快速，仅需不到两分钟的时间即可完成。这使得研究人员能够更高效地处理大量的样本，并在较短的时间内获取到丰富的单细胞数据。      此外，TIGR具有高度的灵活性和可定制性。研究人员可以根据自己的实验需求，自由调整解离过程的参数，如时间、旋转方向、加速度、速度等，以及处理步骤的数量。这使得TIGR能够满足不同应用的要求，并为每个特定的实验设计定制合适的操作协议。      在实验操作方面，TIGR使用简单易学的软件界面，使操作变得直观和方便。同时，其提供的过程控制功能让研究人员能够对解离过程进行精准控制，确保实验的可重复性和结果的稳定性。总的来说，TIGR全自动单细胞制备仪作为一种无酶、快速、可重复的单细胞解离方法，为现代细胞研究提供了强大的支持。它的优势在于温和的样品制备、无酶和标准化的解离过程、易于使用的软件和可定制的协议、节省时间和精确的过程控制。通过使用TIGR，研究人员可以更加高效、准确地进行单细胞分析，推动细胞研究的发展。 具体应用介绍1.3D细胞培养：TIGR可用于制备3D细胞培养模型，如细胞球（Spheroids）、器官样体（Organoids）和肿瘤样体（Tumoroids）。通过温和的解离方法，TIGR可以将细胞从基质中解离出来，并用于构建复杂的3D细胞模型，模拟更真实的生理环境，用于药物筛选、疾病研究和组织工程等。2.单细胞计数：TIGR可用于快速、准确地进行单个细胞计数。通过解离组织样本，TIGR可以将细胞分散成单个细胞悬液，从而方便进行单细胞计数和准确的细胞浓度测量。这在细胞培养、细胞治疗和实验室操作中都是至关重要的。3.原代细胞分离：TIGR可用于分离原代细胞，如原代细胞培养、肿瘤组织等。通过机械解离的方式，TIGR能够高效地将细胞从组织中解离出来，获得纯净的原代细胞群落，为研究细胞功能、细胞类型特征以及药物响应提供可靠的材料。4.癌细胞系的建立：TIGR在癌症研究中也具有重要应用。通过解离肿瘤组织样本，TIGR可以获得单个肿瘤细胞，从中筛选和建立新的癌细胞系。这对于研究癌症发生机制、肿瘤异质性、药物敏感性等具有重要意义。5.流式细胞术：TIGR解离出的单细胞悬液可用于流式细胞术的分析。流式细胞术结合荧光标记和细胞分类技术，可以对细胞进行高通量的表型分析、表面标记物检测、细胞凋亡分析等。6.组织模型：TIGR可用于构建复杂的组织模型，如器官样体（Organoids）和肿瘤样体（Tumoroids）。通过解离和分散组织样本，TIGR可以生成单个细胞悬液，并将其重新组装成3D结构，模拟原生组织的结构和功能。这对于研究器官发育、组织再生和疾病模型构建具有重要意义。7.初级细胞的分离：TIGR在初级细胞的分离方面也具有应用价值。通过温和的解离方法，TIGR可以从组织样本中分离出原代细胞，如神经元、肌肉细胞、心肌细胞等。这为初级细胞的研究提供了宝贵的材料，有助于了解其生理功能和疾病机制。8.肿瘤模型研究：TIGR可用于构建肿瘤模型，如肿瘤球（Tumor Spheroids）和肿瘤切片（Tumor Slice）。通过解离和处理肿瘤组织，TIGR可以获得单个肿瘤细胞或组织切片，用于构建复杂的肿瘤模型。这有助于研究肿瘤的发展、耐药机制以及评估抗肿瘤药物的疗效。

　　普瑞麦迪关注未来：与ThinkCyte一同探索细胞世界的无限可能ThinkCyte是一家成立于2016年的初创公司，总部位于美国加州。以其独特的AI驱动细胞分选平台VisionSort引领生命科学领域的变革，为免疫学、细胞生物学、肿瘤学等多领域提供了突破性技术和工具。其ghost cytometry技术结合了传统荧光流式细胞分选和无标记细胞分选，开创了新的研究和应用可能性。Ghost Cytometry技术原理Ghost Cytometry采用AI驱动的高速图像信息分析和细胞分类技术，结合了无标记和荧光模式。该技术基于一种专有的光学设计，利用结构照明捕捉细胞的图像信息，实现细胞亚细胞级分辨率的成像。图像信息被记录并压缩为1D波形，称为GMI波形，代表细胞的光谱指纹。通过AI训练分类器，他们可以仅基于GMI波形进行无标记的分析和细胞分选。Ghost Cytometry的训练学习与测试AI双模式分析，高内涵独特的细胞指纹处理与对照细胞的GMI信号不同流式分选各种形态的细胞Ghost Cytometry是一种创新的嵌入式人工智能AI技术，以细胞的物理特性（形态学）为基础进行表征和分选，并且于2018年在备受尊崇的《Science》杂志上得到认可。2021年5月19日，专注于开发新型细胞治疗、药物发现和诊断平台的生物技术公司ThinkCyte宣布完成2600万美元B轮融资。该轮融资由SPARX Group、Sysmex Corporation、Sumitomo Mitsui Trust Investment、SBI Group和Itochu Technology Ventures领投。ThinkCyte已经在国际知名的生物医学研究机构Broad Institute（布罗德研究所）完成VisionSort的装机，并且于近期在加利福尼亚州红木城总部为Broad Institute提供了该平台技术的培训。普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司于2023年9月与THINKCYTE公司确立了合作关系，正式成为其公司产品VisionSort的中国区总代理。 VisionSort技术平台的独特之处双模式的AI驱动细胞表征和分选超高速：每秒分选3000个细胞高分辨率“细胞指纹”技术用于无偏发现、无人为干扰区分不同的细胞类型，包括免疫细胞、癌细胞和干细胞等识别细胞的不同状态如细胞活力和活化等实现蛋白质的亚细胞定位以及蛋白质的相互作用等分析结合前向散射、侧向散射、GMI信号、荧光等探测器实现多维度细胞分析的能力ThinkCyte的VisionSort技术已经引起了科研界的广泛兴趣和认可，它不仅改变了我们对细胞的认知，还为生命科学的未来带来了巨大的潜力。产品应用领域广泛的应用细胞存活率（活/死/凋亡）细胞增值率核转移细胞器定位蛋白质-蛋白质相互作用线粒体形态杂质/碎片新陈代谢……免疫学T细胞耗竭T细胞糖酵解水平B/浆细胞分化Terg分类巨噬细胞亚型细胞-细胞间相互作用血液学WBC(白细胞差异)干细胞iPSCMSC肿瘤学癌细胞鉴定慢性粒细胞白血病亚群（有监督/无监督）药物筛选CRISPRDNA条形码化合物临床诊断如检测急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性髓系白血病（AML）患者的骨髓细胞中的白血病细胞，而无需依赖生物染色

　　会议日程&报名：据普瑞麦迪（在线展位）官方消息，该企业成为ThinkCyte公司VisionSort™鬼影流式细胞仪中国区总代理。借此机会，本文特别梳理了关于ThinkCyte公司以及VisionSort™流式细胞仪的相关动态如下：历经7年，商业化布局AI赋能的流式分析与分选技术ThinkCyte成立于2016年，总部位于美国加州。是一家开创基于新型人工智能 (AI) 的细胞分析、表征和分离技术的生物技术公司，2023年开始商业发布其新的细胞分选平台VisionSort™。该流式平台是由Ghost Cytometry提供支持，这是一种创新的AI驱动技术，用于根据细胞的形态学对细胞进行表征和分类。它是第一个将传统荧光流式分选仪的分析功能与执行无标记细胞分选和细胞群无偏形态分析的能力相结合的细胞分选仪。值得强调的是，Ghost Cytometry是一种创新的嵌入式人工智能AI技术，以细胞的物理特性（形态学）为基础进行表征和分选，并且于2018年在《Science》杂志上得到认可。（详情点击查看：SCIENCE：AI驱动鬼影流式，实现高通量分选、分析）VisionSort Platform技术简介具体而言该技术基于一种专有的光学设计，利用结构照明捕捉细胞的图像信息，实现细胞亚细胞级分辨率的成像。图像信息被记录并压缩为1D波形，称为GMI波形，代表细胞的光谱指纹。通过AI训练分类器，他们可以仅基于GMI波形进行无标记的分析和细胞分选。结合的功能可以使研究人员不仅可以根据已知标记和形态学表型的组合来查看细胞，还可以挑选出独特的群体用于下游处理或分子分析。ThinkCyte企业动态ThinkCyte成立于2016年，是一家专注于开发新型细胞治疗、药物发现和诊断平台的生物技术公司，总部位于美国加州。2023年10月，普瑞麦迪成为ThinkCyte公司VisionSort™鬼影流式细胞仪中国区总代理。2023年7月17日，ThinkCyte宣布与赫尔辛基大学芬兰分子医学研究所（FIMM-HiLIFE）建立战略研究合作伙伴关系，旨在促进对白血病的理解和治疗。这项研究合作利用了ThinkCyte新的人工智能（AI）驱动的细胞表征和分选平台VisionSort，以及FIMM世界知名的临床注释白血病样本生物库和药物筛选方面的专业知识，旨在揭示如何治疗白血病和其他血液恶性肿瘤的新见解。2023年1月23日，生物技术公司ThinkCyte宣布任命Dr. Diether Recktenwald Ph.D.和Dr. Bo E. H. Saxberg M.D., Ph.D.为高级科学顾问委员会（SAB）成员。这些任命补充了ThinkCyte现有咨询团队的优势，并为ThinkCyte科学顾问委员会带来了对新兴流式细胞仪市场、战略产品开发和临床应用的深刻经验见解。2023年1月10日，生物技术公司ThinkCyte与Axcelead Drug Discovery Partners（DDP）宣布了一项研究合作，重点是开发新的方法来筛选治疗人类疾病的候选药物。这项合作将把ThinkCyte的人工智能驱动的细胞表征和分选技术Ghost Cytometry与Axcelead DDP的表型筛选技术及其超过150万种候选药物的多样化化合物库结合起来，评估这些化合物如何在疾病环境中改变细胞表型。2021年5月19日，ThinkCyte宣布完成2600万美元B轮融资。该轮融资由SPARX Group、Sysmex Corporation、Sumitomo Mitsui Trust Investment、SBI Group和Itochu Technology Ventures领投。2020年 7月1日，日立（Hitachi）表示将与ThinkCyte合作开发人工智能驱动的细胞分析和分选系统。ThinkCyte用于高通量和高含量单细胞分选技术“ghost cytometry”，将与日立大规模仪器制造能力相结合2020年5月29日，ThinkCyte宣布完成1500万美元B轮融资。该轮融资方有：SPARX Group、Fuyo General Lease、Itochu Technology Ventures。

　　高纯度、高产量    微量多种样本    高效率MagSi  免费试用装产品信息·组织与细胞核酸提取试剂盒（磁珠法） ·病毒核酸提取试剂盒（磁珠法） ·cfDNA尿液/血液核酸提取试剂盒（磁珠法） MagSi 试用装活动参与方式 扫码填写相关信息，审核通过后即刻获得试用装填写试用反馈后更有精美小礼品赠送哟 MagSi 产品详情1组织与细胞核酸提取试剂盒产品特点·流程简单，96个样品制备时间：约40min·不需要苯酚/氯仿等危险化学品的使用·不需要重复离⼼、真空或柱分离·优秀的完整性DIN>

　　8.1 ·基因组DNA的高产量和高纯度 ·适用于多种下游应用·适用于不同类型样本（包括海洋生物组织样本或珍稀细胞样本） 产品性能提取后不同小鼠组织(肝、脑、肺、尾)与国际主流供应商的DNA浓度进行对比。使用Agilent TapeStation 4150对比提取后产物与竞品从冷冻小鼠肝组织中纯化DNA的完整性。Magtivio产品所有DNA完整性指数(DIN)均>

　　8.1。从结果来看：magtivio组织与细胞核酸提取试剂产品对小鼠组织的提取效果均优于国外某品牌，表明本公司试剂盒（磁珠法）产品性能较优。2 病毒核酸提取试剂盒产品特点·验证了SARS-CoV-2诊断⼯作流程·流程简单，可在室温完成 ，产量高 ·从粘性样品裂解物中也可快速分离 ·96个样品制备时间： ·适用于多种酶的下游流程·易于实现自动化操作 ·可用于多种样品采集装置中 产品性能在SARS-CoV-2检测测试中，将不同数量的SARSCoV-2阳性唾液样本稀释在SARS-CoV-2阴性唾液中。采用qRT-PCR检测SARS-CoV-2的RNA靶序列(S-和n2基因)。在所有样品中均获得内源控制基因(IC， β - actin)的均匀扩增，表明不存在PCR抑制。3 cfDNA血液/尿液核酸提取试剂盒产品特点·适用于新鲜或冷冻血浆、血清与尿液样本·用于1至4ml样品，同时支持扩展用于大体积10ml样品容量 ·平均产量:每毫升人血浆0.5至4 ng cfDNA(但供者与供者之间高度可变)·在56°C裂解后，所有其他步骤均在RT下完成 ·不需要载体RNA ·磁珠在优化的存储缓冲液中供应，以减少沉淀时间 ·适用于许多酶的下游应用，特别是RT- qpcr和测序·24个样品的处理时间:~60分钟产品性能采集的人血浆中纯化的cfDNA的电泳图(a) magtivio (b)国际主流供应商，使用magtivio试剂盒获得高质量的cfDNA，而另一产品产物显示高分子量的DNA污染(高亮)从不同体积的样本中提取cfDNA，并使用TapeStation 4150定量cfDNA检测(无细胞DNA检测)。在不同样品体积的提取中均获得了高cfDNA产量。

　　为保护人们免受流感病毒感染，并减少与流感有关的死亡人数，生物制品公司每年都需要生产流感疫苗。因此，相关企业能 及时生产和验证各批次流感疫苗是至关重要的。每批疫苗都需根据其中血凝素(HA)含量评估效力。流感病毒可利用血凝素(HA)，与宿主细胞膜上的唾液酸受体结合，侵染细胞。[1]目前评估疫苗批次的金标准方法是单径向免疫扩散(SRID)试验，它让病毒抗原在含有抗原特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散。然后，测量沉淀带的大小，使用一组校准过的参考抗原将沉淀带的大小与样品中抗原的数量相关联[2]。尽管SRID自1978年以来一直在使用，但它有一些缺点。首先，它是一种离线方法，因为样品必须从生产线上取出，通过一个单独的过程进行分析。其次，SRID所需的参比血清和抗原试剂可能需要6个月的准备时间，从而导致疫苗批次上市的延迟[3]。此外，SRID的分析精度和通量也较低[4]，执行SRID大约需要22小时[5]。因此，迫切需要开发一种更快速的方法来评估流感和其他疫苗的效力，特别是在流感疫情爆发时期。虽然有其他基于免疫测定法和色谱法的方法可以确定疫苗制剂中的HA含量，但它们缺乏对生产中病毒颗粒进行过程分析的能力。免疫测定也被认为是费时费力的。而表面等离子体共振(SPR)检测可以在几分钟到几小时内产生实时数据，并且样本无需标记。通过表面化学优化和生物分子选择性捕获，可以实现对目标生物分子的高灵敏度和高重复性的检测。Affinite仪器公司紧凑型的SPR仪器将使基于细胞的病毒颗粒生产的在线实时监测成为现实。本应用案例将展示利用Affinite的P4SPRTM对流感疫苗生产中HA含量进行监测的潜在用途。实验过程系统设置和传感器芯片功能化本研究使用了配备4个独立微流控通道的P4SPR(图1)。图1     4通道分子互作仪P4SPRTM首先，使用去离子水通过SPR装置运行60s，以确保基线的稳定性。然后，为了减少非特异性结合，使用我们专有的AfficoatTM表面修饰的金膜传感器芯片，并将所有以下蛋白质样品和试剂手动注射到P4SPR中(见图1)。为了激活传感器表面以捕获抗体固定，用EDC/NHS处理；随后用乙酸钠洗涤。将HA捕获抗体(10µg/mL)固定于传感芯片表面，反应20分钟；随后用乙酸钠进行清洗。为了减少非特异性结合，通过注射1 M乙醇胺(pH 8.5)阻断传感器表面的活性位点，反应10分钟。然后用运行缓冲液冲洗传感器表面。图2描述了在金膜传感器芯片上的实验设置。     图2    SPR法检测血凝素的实验示意图HA标准曲线利用运行缓冲液制备HA，在A至C通道中从0.5µg/mL滴定至25µg/mL，每次10分钟。图3显示了放置在传感器芯片顶部的微流控通道图案。作为对照，通道D用于注入运行缓冲液。每组HA浓度和运行缓冲液的SPR信号位移保存在P4SPR控制软件中。                                                图3    四通道分子互作仪P4SPRTM的微流控通道俯视图结果与讨论初始的P4SPRTM洗涤、稳定和传感器芯片功能化步骤大约需要38分钟。注入HA样品以创建标准曲线小时。因此，生成标准曲线分钟。依次注射HA浓度时，共振信号成比例增加，证明了HA与固定的抗HA抗体的结合(图4)。在每个HA浓度下，将三个重复的共振信号平均并在Excel中绘制。得到的标准曲线µg/mL之间具有高度的线    各浓度HA在通道A, B和C(红色、白色、绿色 三次重复)以及参照通道D(蓝色)的传感信号图5.  血凝素与抗血凝素抗体结合标准曲线SPRTM可以固定抗HA抗体到我们专有的AfficoatTM传感器芯片上，并有潜力通过建立标准曲线来检测样品中的HA浓度。传感器表面准备可在40分钟内完成，每个样品只需要10分钟即可获得数据。通过进一步的实验优化，P4SPR将能够在实际生产和纯化疫苗样品中评估病毒效力。Affinite仪器优势～Affinite仪器公司的P4SPRTM四通道设计，无论作多样本筛选，还是重复性检测，都能轻松实现。高效便捷和信号稳定是P4SPR的主要特点；也是百万以内少有的四通道分子互作仪。在疫苗生产过程中，安装在线SPR仪器对疫苗批次进行实时评价是有利的。同时，在生物医药研究的其他领域，P4SPR也能帮助用户揭示生物分子相互作用的奥秘。了解更多产品信息，请扫码↑登记信息，我们会在第一时间与您联系！ 参考文献1. Emi Suenaga, Hiroshi Mizuno & Penmetcha K.R. Kumar. Influenza virus surveillance using surface plasmon resonance. Virulence, 2012, 3, 464-470.2. M.S.      Williams.      Single-radial- immunodiffusion as an in vitro potency assay for human inactivated viral vaccines. Vet. Microbiol., 1993, 37, 253-262.3. Laurent Durous, Thomas Julien, Blandine Padey, Aurélien Traversier, Manuel Rosa- Calatrava, Loïc J. Blum, Christophe A. Marquette, Emma Petiot. SPRi-based hemagglutinin quantitative assay for influenza vaccine production monitoring. Vaccine, 2019, 37, 1614-1621.4. Carl-Fredrik Mandenius, Ronghui Wang, Anna Alden Gunnar Bergstrom, Sabine Thebault, Charles Lutsch, Sten Ohlson. Monitoring of influenza virus hemagglutinin in process samples using weak affinity ligands and surface plasmon resonance. Anal. Chim. Acta, 2008, 623, 66- 75.5.C. Estmer Nilsson, S. Abbas, M. Bennemo, A. Larsson, M.D. Hämäläinen, . Frostell- Karlsson. A novel assay for influenza virus quantification using surface plasmon resonance. Vaccine, 2010, 28, 759–766.

　　热烈祝贺普瑞麦迪成为细胞因子一线品牌——法国Core Biogenesis中国区总代理。Core Biogenesis是一家以细胞因子产品线闻名业内的厂家，致力于为干细胞研究和细胞制造工业提供下一代重组蛋白。其独家研发的植物来源细胞因子，打破了传统细胞因子局限性，以无动物、无抗生素、无内毒素、无致热性，无细菌、病毒和朊病毒等优势，迅速占领国际细胞因子市场。植物系统-生产平台CORE BIOGENSIS研发了专有的植物系统生产平台-亚麻荠，用来进行重组蛋白的表达和生产。其生产的多个物种(如人，牛)的重组生长因子和细胞因子，广泛应用于iPSCs, MSCs，免疫细胞等领域。 产品优势高纯度和生物活性产品:纯度>

　　95%，EC50值在0.5-1ng/mL细胞因子及其稳定：FGF-2 STAB®半衰期增加到7-20天无生物安全风险:无菌和无内毒素不含动物衍生成分节约成本:远远低于市场价植物系统-生产平台重组FGF-2有“野生型”和FGF-2 STAB®版本。最新的是热稳定的FGF-2工程序列，它将蛋白质的半衰期从12小时(WT)增加到7天(FGF-2 STAB®)。由于其在干细胞增殖、表型和成本方面的优势，该产品正在成为iPSC研究和制造应用的新金标准。稳定水平的FGF-2 STAB®无需重复补充，节省了时间和金钱。简便的操作流程突破了重组蛋白的生产瓶颈国内细胞因子的生产大多采用HEK293, CHO菌株来源，植物目前只有大麦和水稻因此会存在成本高，内毒素等问题的困扰。但是核心生物发生采用植物来源的苜蓿/亚麻籽。利用油脂蛋白融合技术，靶向分离脂体感兴趣的重组蛋白，脂体是位于亚麻荠种子中的植物特定细胞器，最终产品不含杂质。CORE BIOGENSIS利用植物作为生物工厂来大规模生产高价值的细胞因子。解决了临床应用的关键难题无动物成分和内毒素:生长因子控制细胞的维持、增殖和分化，是干细胞研究和再生医学的关键工具。内毒素污染的微小差异可对细胞培养产生巨大影响。我们的无动物成分和无内毒素生长因子增加了细胞培养的一致性，这是获得可重复性结果和过渡到临床应用的关键。超前的生产技术专利增产技术专利: (UBaaS)平台简化和加速了可持续、高性能重组分子的量产和纯化，同时降低了生产成本。专有的提取方法:UBaaS平台可以将目标分子分离到特定的植物隔间，使提取更快，更可扩展，更便宜。 产品列表12.04FGF-2 human10ug/100ug/1mgFGF-2 bovine10ug/100ug/1mgFGF-2 STAB®10ug/100ug/1mgIGF1human10ug/100ug/1mgIGF1bovine10ug/100ug/1mgEGFHUMAN10ug/100ug/1mgEGFBOVINE10ug/100ug/1mgALMUMIN HUMAN10ug/50ug/1mgALMUMIN BOVIN10ug/50ug/1mgIL-15 HUMAN10ug/50ug/100ugIL-2 HUMAN10ug/50ug/1mgINSULIN HUMAN10ug/50ug/1mgTGFB1 HUMAN50ug/500ug

　　在做多肽纯化时你是否会遇到实验耗时、费力、成本高、复杂肽纯化困难等问题？是否时常还因为实验室没有昂贵的多肽纯化仪器而耽误实验进度？别着急，现在有一种多肽纯化的新方法可以很好的为你解决这些烦恼。它不同于传统的色谱纯化法，打破了目前多肽研发和生产的障碍，无需使用液相色谱仪，即可轻松实现高效多肽纯化。这种方法基于PEC纯化技术，利用首个商业化的多肽纯化试剂盒来实现。为什么越来越多的人选择它？这是一种怎样的技术，为什么可以不使用液相色谱仪就能纯化多肽？它又能为我们带来哪些好处呢？接下来，就让我们一起来了解一下这种多肽纯化的新方法。一 为什么选择PEC多肽纯化试剂盒进行多肽纯化？原理——基于化学选择性分离原理，可以轻松分离共洗脱和封闭洗脱杂质复杂肽纯化——有效纯化复杂肽，例如长肽、聚集肽和疏水肽，纯度达85%以上高通量——提供高通量多肽纯化方案，一天内多达96次并行纯化快速可靠——快速创建肽库用于更可靠的筛选和验证分析低溶剂消耗——极大降低溶剂消耗量，比传统纯化方法降低75%以上灵活性——可实现在同一台仪器中，先合成后纯化，并且有多种纯化规模的试剂盒可供选择，满足几乎任何规模的多肽纯化二 什么是PEC技术？PurePep EasyClean（PEC）技术的核心是使用了一种新开发的可裂解连接分子（PEC Linker RC+）和活性过滤材料（Agarose100）用于捕捉和释放（Catch & Release）目标肽。基于化学选择性分离，简单六步即可获得PEC级肽，平均纯度可达85%。1 PEC Linker RC+耦合2 脱树脂3 共价捕获4 洗涤5 沉淀并溶解肽6a 还原PEC Linker RC+6b 通过弱酸释放目标肽三 PEC多肽纯化试剂盒有哪些常见的应用？1 有效去除共洗脱杂质通过SPPS（固相多肽合成）合成亲水性肽——组蛋白H3（1-20），由于共洗脱杂质的存在，获得高纯度的组蛋白H3比较困难，利用PEC多肽纯化试剂盒只需一步就可以有效去共洗脱杂质，获得更高纯度的组蛋白H3。2 极大降低溶剂消耗SPPS是一个原子利用率很低的一个过程，这会导致整个过程需要消耗大量的溶液和试剂，并且利用RP-HPLC（反向高效液相色谱）纯化多肽也会消耗大量的有机溶剂。在这个研究中，实验人员比较了PEC和RP-HPLC在进行多肽纯化时溶剂的消耗和废物的产生量。相较于RP-HPLC，使用PEC多肽纯化试剂盒可以降低高达75%-85%的总废物产生量。3 突破疏水性肽（aggregating peptides）、聚集肽（hydrophobic peptides）的纯化利用SPPS在合成长肽时通常会产生很多难以纯化的杂质，并且RP-HPLC难以纯化疏水性肽、聚集性肽，比如纯化PTH（1-84）长肽和疏水性的强聚集性CMV（81-95）肽。利用PEC技术可以一次纯化超长肽（＞50个氨基酸），并且可以从复杂的混合物中化学选择性分离目标肽，突破了利用传统方法去纯化疏水性肽和聚集肽的局限性。4突破修饰困难肽的纯化最近发现潜在的23聚体肽治疗剂（SBP1）是SARS-CoV-2病毒上刺突蛋白的结合剂，如果能够轻松合成获得此类肽并且可以进行进一步修饰，那么对于支持全球各个实验室对COVID-19等新型疾病的研究将至关重要。利用PEC纯化SBP1可提高目标肽的纯度到85%以上，并且不需要复杂的纯化步骤，简单的纯化程序即可实现对聚乙二醇化困难肽的纯化。5 一天合成20个新抗原肽制造的过程中肽的纯化阶段非常耗时，PEC技术在多肽纯化阶段可以大大节省时间。在这个案例中，利用PEC试剂盒一天即可完成对20个新抗原肽的纯化，可以显著改善肽制造的周期，并且最终平均纯度为91%。6 PEC与FLASH（快速色谱）比较为了比较PEC技术和FLASH纯化多肽的回收率，用两种方法纯化了8个多肽并进行了研究。结果表明，PEC在提高肽纯化的回收率方面具有显著的优势。7 加速疫苗开发PEC技术可以去除大多数可能导致假阳性信号的肽类杂质，并提高随后的筛选或验证分析的可靠性，这些“PEC级”肽库在SARS-CoV-2表位验证研究中表现出优异的性能。使用PEC多肽纯化试剂盒可以加快临床前疫苗的开发。8 并行多肽纯化通过SPPS合成的肽库中副产物和其他杂质的多少对于可靠的分析结果至关重要。然而在多肽筛选（N>

　　24）中，由于传统肽的平行纯化很难实现，因此经常使用粗肽。而我们通过PEC技术可以并行纯化96个多肽，克服了这一瓶颈。这极大缩短了建立肽库的时间，并且大大降低成本。9 有利于二硫化物形成二硫键的形成仍然是改进肽药物最有吸引力的修饰之一，二硫键桥提供了特殊的化学和构象稳定性。然而，以传统的肽纯化方法，二硫化肽的制造仍具有很大挑战性。本案例展示了如何用固相修饰的组合方法制备纯化二硫肽，可以发现，PEC技术可以快速制备修饰纯化肽，以加速二硫化物多肽药物的开发。10 绿色制造由于溶剂浪费和能源消耗，制药成分的生产对环境有重大影响。因此，该行业需要新的创新技术来进行绿色药物生产。本研究强调了无DMF固相多肽合成（SPPS）及其与低溶剂消耗PEC纯化技术的可行性，以绿色方法生产比伐芦定。相比传统的色谱纯化，PEC技术可以减少有机溶剂消耗高达75%以上，促进制药生产时的“绿色制造”。

　　平行多肽纯化PurePep EasyClean (PEC) 纯化技术能够可靠地并行纯化简单和复杂的多肽，而且溶剂消耗量低。该试剂盒是 PurePep 系列产品的组成部分，是为生产复杂多肽药物或疗法的实验室提供的全面解决方案。PurePep 技术和仪器有助于加快生物制药的突破性发展。 PurePep 的独特之处与传统的生产流程不同，PurePep 工作流程将平行和正交的多肽纯化与合成技术整合到一个功能强大的系统中，可根据您的需求进行调整。PurePep 是一种端到端的解决方案，可帮助您的实验室提高效率和性能，在价值链的任何阶段都能获得可靠的结果。 PurePep® EasyClean多肽自动纯化试剂盒——全球首个多肽自动纯化解决方案PurePep EasyClean (PEC) 自动试剂盒采用了基于新型无痕可裂解连接分子（PEC-Linker）的捕捉-释放方法、活性过滤材料和相关耗材，用于多肽的自动纯化。 产品亮点每次多肽纯化可减少 90% 的操作时间在 6 小时内完成 6 次或更多次多肽纯化与 HPLC 相比，有毒溶剂使用量减少 90%在一台仪器上完成多肽合成和纯化PurePep EasyClean 技术适用于 PurePep 多肽合成仪，Bwin必赢包括 PurePep® Chorus 和 Symphony® X 以及其他仪器。PurePep EasyClean多肽自动纯化试剂盒的优势

　　表面等离子共振（SPR）用于实时监测，从离子到病毒等生物分子之间的相互作用，这项技术在不需要对生物分子进行标记的情况下，可以让您实时检测分子互作，并获得动力学、亲和力、结合特异性和浓度。Affinité SPR分子互作系统集合了高效性、通用性和高性价比等特点，分子互作仪通过SPR检测器，实时监控在传感器芯片上发生的分子间相互作用，样品和试剂通过微流控系统运送到芯片上，并且仪器采用直观的软件，收集数据和分析结果。 传感器是由表面涂有一层薄金膜的玻璃片构成，在大多数应用中，传感器金膜上覆盖的是葡萄糖基质，葡萄糖不仅可以作为固定分子的基底，还能为相互作用提供亲水环境，可以使用其他的基质固定特定类型的分子，传感器表面的特异性是由固定分子的性质决定的，因此，一个互作分子偶联在传感芯片的表面，另一个通过连续流系统输送到芯片表面，无论所涉及的分子性质如何，我们称固定在芯片表面的分子为配体，称溶液中的分子为分析物。 Affinité SPR分子互作仪利用表面等离子体共振现象，来实时检测生物分子间的相互作用，SPR使从传感器表面的玻璃侧以特定角度反射的光强度降低，当分子结合到传感器表面时，传感器表面的折射率发生变化，改变了最小反射强度的角度，SPR角度的变化与结合物质的质量成正比。传感器、微流控系统和SPR检测器三者共同工作，来检测生物分子的相互作用，对反射指数变化的检测结果构成传感图，其中Y轴上的结合响应值与X轴上的时间相对应，通过分析生成的传感图，可以测定是否结合、特异性、亲和力和动力学数据，传感图提供了整个相互作用过程的实时信息。这意味着仅一个 SPR实验，您现在已经获得了关于结合的丰富信息，这有助于您理解相互作用的动态过程以及得到定量的数据，而这一切都无需标记。Affinité SPR分子互作系统是目前市场上唯一百万以内即可拥有的四通道分子互作产品，主要功能是进行生物分子间亲和力检测和结合动力学检测等。 特点基于SPR原理，实时、无标记、检测相互作用适用于小分子化合物、核酸、多肽、蛋白、抗体、脂类、多糖、纳米颗粒等多种类型样品可检测复杂样本，比如血清、唾液、细胞裂解液等10分钟内完成1个样本测试，一组实验可获得结合特异性、亲和力、动力学等数据四通道检测，结合参照通道信号，可进行背景扣除，获得可信数据仪器稳定，操作简单，维护简便仪器采用注射泵组件，控制精准，信号稳定仪器性价比高，单个实验室即可负担AfficoatTM芯片可减少SPR试验中的非特异性结合芯片耗材成本低，并且可重复多次使用，大大降低仪器运行成本

　　OPTOLANE是一家基于半导体技术的体外诊断平台公司，致力于开发高灵敏度的诊断系统。研发了能够同时进行实时荧光PCR和数字PCR的LOAA系统。LOAA系统基于非终点法数字PCR技术，结合了实时荧光PCR技术与数字PCR技术，可以有效区分假阳性扩增。传统的微滴生成式数字PCR，通常需要微滴生成、转移、PCR扩增、微滴荧光扫描等多个流程步骤，而LOAA系统全自动化一体机式设计，属于芯片式数字PCR，液滴生成、PCR扩增及结果分析无缝衔接，减少操作环节，有效缩短检测时间。该技术的核心概念是将光学系统和温控系统集成到了半导体传感器中。图 1 半导体CMOS传感器图 2 数字PCR芯片盒OPTOLANE拥有超过10年的半导体技术与生物技术融合经验，并致力于成为全球领先的“实时数字荧光定量PCR”系统制造商。普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司于2023年7月与OPTOLAN公司确立了合作关系，正式成为其公司产品实时数字PCR的中国区总代理。图 3 LOAA On-point图 4 LOAA-MOPTOLAN产品主要优势无需标准曲线即可实现绝对定量设计可变分析扩展实验程序利用实时数字 PCR 提高检测准确性每个反应的扩增曲线可排除假阳性结果OPTOLAN产品应用领域绝对定量稀少突变和SNP检测基因表达甲基化检测拷贝数变异分析普瑞麦迪诚邀各区域经销商共同推广OPTOLANE实时数字PCR仪在中国的市场！

　　组织透明化再迎巅峰—6h彻底透明化小鼠全脑！*极速*透明效果极佳*适用多种样本类型*抗荧光淬灭 韩国Binaree是一家以组织透明化技术闻名业内的厂家，其推出的组织透明化系列产品无论是在速度，还是透明化效果上都展现了无与伦比的优势。以其超前的水性透明化技术，从光的散射和吸收、折射率匹配和脂质去除3各方面逐步优化，实现了三维高分辨和抗荧光淬灭效果，并且操作简便，适用多种样本类型，可快速的达到透明化效果。1) 快速透明化 ：斑马鱼全脑1小时；小鼠全脑6小时；大鼠全脑48小时2) 自动控制 ：操控简单，无需培训3) 适用于大样本 ：可以有效适应透明化处理过程中尺寸的变化，防止样本变形或损坏4) 有效保护标志物：全自动温度控制；非有机溶剂组织透明化处理技术，具有更好的生物相容性、安全性、环保性组织透明化技术时间比较不同样本透明化时间多篇高分文献，迅速引领组织透明化科研市场产品在CNS展会一上线，便吸引了众多科研工作者，火爆全场免费试用装，请速速预约，先到先得！！！

　　原文链接：用光构筑生命 — 应用案例系列欢迎来到【LUMEN X Gen 3】用光构筑生命应用案例系列！在这个系列中，我们将带您深入探索生物打印技术在不同领域中的应用，探讨其所带来的变革和革新。 LUMEN X Gen 3 是一种将光固化生物打印物技术，通过利用高度精确的激光束来控制细胞的生长和形态，实现了对三维生物结构的精准打印。 我们将通过一系列案例，向您展示这项技术在组织工程、医学研究、生命科学等领域的应用，为您呈现一个崭新的、光构筑的生命世界。应用案例 使用3D打印技术制作的水凝胶微针阵列，用于间质流体生物标志物的提取和比色检测。让我们深入了解一项成功的应用案例，展示了使用3D打印水凝胶微针阵列进行间质流体生物标志物提取和比色检测的方法。 该研究利用了3D打印机 LUMEN X 制造了微米级的针状结构，并将其应用于间质流体中生物标志物的提取和检测。通过将样品与微针阵列接触，生物标志物被捕获并集中在微针上，然后可以通过比色检测方法进行定量分析。该研究的结果表明，这种3D打印水凝胶微针阵列的方法在生物标志物提取和检测方面具有潜在的应用前景，并展示了高效、灵敏和可重复的性能。客户应用案例3D Printed Hydrogel Microneedle Arrays for Interstitial Fluid Biomarker Extraction and Colorimetric Detection 连续监测生物标志物在医学和健康管理中具有重要意义，然而传统的血液采样和实验室测试方式存在侵入性的缺陷。为了克服这些限制，研究人员不断探索非侵入性的生物标志物检测方法，如尿液、泪液、汗液和唾液。然而，这些方法在浓度和动力学方面存在限制，并且与血液中的生物标志物相关性较弱。为了解决这一问题，皮下组织间质液（ISF）作为一种生物标志物来源备受关注，其分子组成与血浆最为接近，并且具有其他独特的特征。微针阵列（MNA）作为提取皮肤ISF的有效方法，具有非侵入性和适用于诊所或资源有限环境的优势。在众多的MNA材料中，水凝胶基的MNA表现出更好的ISF提取效率、生物相容性、制造成本低、产量高以及对皮肤无损伤等优势。为了对ISF进行原位表征，研究人员开始在MNA上附着生物传感器，实现对代谢物的实时监测。 为了制造更复杂和精确的MNA结构，研究人员将目光转向了三维打印技术。相比传统的制造方法，三维打印技术具有更高的分辨率和制造灵活性，可以实现更精细的MNA结构。本研究便介绍了使用三维打印技术制造的彩色MNA，以实现多重透皮代谢物检测。其中包括pH和葡萄糖浓度的实时比色检测，为连续监测提供了全新的可能性。该研究的目标是评估PEGDA水凝胶MNA在ISF检测应用中的可行性，并寻找最佳规格的MNA。通过提供可自行管理的连续监测方案，该技术为安全和长期监测以及慢性疾病的优化管理提供了前景。未来，基于三维打印技术的彩色MNA有望为生物标志物监测领域带来革新。图1。（a）基于水凝胶的微针贴片的应用过程示意图；（b） MNA的扫描电子显微镜（SEM）图像；（c） 具有不同横截面的印刷微针；（d） 微针贴片。数字光处理生物打印方法制造微针阵列本文介绍了使用数字光处理（DLP）生物打印 LUMEN X 方法制造微针阵列的过程。通过计算机辅助设计（CAD）软件生成（四乘四）的3D模型，然后将模型分割成多个横截面图像。这些数字图像被发送到数字微镜装置（DMD），该装置会产生图案化的光（波长为405nm）。通过投影透镜将光集中在光固化前体溶液的表面上，投影光使液体光固化前体溶液转变为固体图案化层。通过逐层重复这一过程，可以创建出三维的微针阵列。 在本研究中，我们采用分子量为700 Da的聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA 700）作为MNA的单体材料。为了实现光固化，我们使用柠檬黄作为光吸收剂，并利用苯基-2，4，6-三甲基苯甲酰基膦酸锂（LAP）作为光引发剂。这种组合材料能够有效地实现微针阵列的制造，并具有良好的生物相容性和光固化特性。 通过数字光处理生物打印方法制造微针阵列，我们可以为多重透皮代谢物检测提供创新的解决方案。这项技术具有制造复杂结构、高分辨率和制造灵活性的优势，为连续监测提供了可行性，并为安全和长期的慢性疾病管理提供了新的前景。图2:微针阵列的制造工艺。（a） MNA的DLP打印示意图；（b） 具有不同横截面形状的MNA的CAD设计；（c） 针头的尺寸，（i）针头的高度、尖端角度和拐角半径，（ii）不同形状的针头截面的比较；（d） 具有不同横截面形状的印刷微针的SEM图像。 研究人员将受测蚊子放置在装有摄像头的透明塑料箱中，这可以清楚地观测到昆虫的行为，如每个站点的着陆频率，它们的停留时间，它们是否咬人，还有它们花多长时间进食。研究人员测试了一些变量，包括应用基于DEET或柠檬桉树油的驱虫剂的影响。但他们也进行了选餐实验，观察蚊子对去纤维蛋白血、红色印度墨水或PBS的反应。通过本研究，我们展示了使用3D打印的PEGDA微针提取皮肤间质液（ISF）并检测生物标志物的可行性。我们研究了PEGDA浓度和针头直径对微针阵列的机械强度和提取性能的影响，并确定了最佳的MNA规格。 微针阵列不仅包括多路传感器，可用于对提取的ISF中的多种生物标志物（特别是pH和葡萄糖）进行原位比色检测，而且微针贴片的使用非常简单，甚至可以用肉眼进行观察。通过安装专门开发的应用程序，智能手机可以用于定量RGB分析。此外，类似的方法也可以用于测试其他代谢产物，如胆固醇和乳酸。 所开发的设备具有潜力在慢性疾病的医疗实践中得到应用。通过提供可靠的、非侵入性的连续监测方案，这项技术有望为安全性和长期管理方面的慢性疾病提供新的解决方案。未来的研究可以进一步探索这种技术在临床实践中的应用，并优化其性能，以满足不同疾病和个体的需求。总结LUMEN XLUMEN X 是一款高端的光固化生物打印机，提供了DLP生物打印技术，制造了精确的MNA。通过CAD软件和DMD，实现了光固化前体溶液的转化，为制备复杂MNA提供了方法。其技术允许逐层光固化，创造了三维MNA结构，满足我们的研究需求。LUMEN X 推动了监测技术的发展，为医学实践和慢性病管理带来新的前景。通过用光构筑生命希望我们所介绍的内容能够为您带来一些有用的信息和启发。如果您正在寻找一个可靠的生物打印机，LUMEN X 将是您的理想之选。探索 LUMEN X Gen 3

　　加拿大Affinité是一家专注于分子互作研究的公司，基于无标记高灵敏表面等离子共振技术（SRP技术）开发了性价比极高的个人型分子互作仪，旨在让每位科研工作者和实验室都能够顺利的把分子互作相关实验开展起来，助力生物科学发展。P4-Hybrid是Affinité公司2023年夏季最新推出的一款分子互作仪，它不仅兼具强大的分子互作检测和分析的能力，而且还是目前市场上第一款百万元以内即可拥有的四通道分子互作仪。P4-Hybrid改进了上一代传感芯片微流池的设计，现在支持四通道检测，并且四个通道相互独立，可以单独使用，也可以组合使用，极大的增加了实验的灵活性。我们可以选择在同一张芯片上对不同的分析物进行试验，也可以利用不同的通道测试同一种样品分析物，进行重复性试验。四通道的独立设计大大降低了芯片的消耗，从而节省实验经费。除此之外，开发团队还在仪器很多方面进行了改进，包括应用新流路系统、新型光学器件、增加自动化样品处理功能以及对分析软件进行优化等等，以提高仪器整体性能，下面我们一起来了解一下P4-Hybrid具体的功能和特点。功能生物分子间亲和力检测、结合动力学检测等特点* 基于SPR原理，实时、无标记、检测相互作用* 适用于小分子化合物、核酸、多肽、蛋白、抗体、脂类、多糖、纳米颗粒等多种类型样品* 可检测复杂样本，比如血清、唾液、细胞裂解液等* 10分钟内完成1个样本测试，一组实验可获得结合特异性、亲和力、动力学等数据* 四通道同时检测，结合参照通道信号，可进行背景扣除，获得可信数据* 仪器稳定，操作简单，维护简便* 仪器采用注射泵组件，控制精准，信号稳定* 仪器性价比高，单个实验室即可负担* AfficoatTM芯片可减少SPR试验中的非特异性结合* 芯片耗材成本低，并且可重复多次使用，大大降低仪器运行成本另外，我们还提供非常完备的芯片服务，包括氨基偶联芯片、组氨酸标签捕获芯片、生物素芯片、膜固定芯片和自主研发的AfficoatTM芯片等等，当然，还支持芯片定制服务。以支持P4-Hybrid具有广泛的应用场景，包括蛋白、多肽、抗原、抗体、核酸、糖类、脂质、小分子化合物等各种样品的相互作用分析。总之，P4-Hybrid是一款高性能且价格亲民的多通道分子互作仪，可应用于研究信号通路、调节机理、结构分析、抗体质控、药物筛选和亲和力检测等等方面。相信一定可以成为您在分子互作相关研究时的最佳拍档。普瑞麦迪作为加拿大Affinité公司在中国的唯一总代理，欢迎各位专家老师前来咨询了解，除了P4-Hybrid，还有ezSPR以及P4SPR等多款各具特色的分子互作仪可供选择。如有需要，我们还可以提供DEMO演示实验。并且我们拥有专业的技术服务团队，可以随时交流分子互作实验设计与方案的选择。另一方面，我们还提供完备的亲和力检测服务，收到样品最快不到一周即可出具SPR分析结果。所以，我们不仅可以提供先进的仪器以增强您在做实验时的“战斗力”，其专业的技术团队还可以为您提供安全的“后勤”保障，通过如此全面的服务，来为您的分子互作研究“保驾护航”！

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　　由于共洗脱杂质的存在，对固相多肽合成法（SPPS）合成的亲水性肽——组蛋白H3（1-20）的纯化是一个艰巨的挑战。在这个分享案例中，我们展示了如何通过使用PurePep EasyClean （PEC）多肽纯化试剂盒和反向高效液相色谱法（RP-HPLC）进行正交肽纯化来提高肽的纯度和降低纯化过程中的溶剂消耗。引言肽相关的一些杂质存在，会显著影响药物研发的结果（例如假阳性结果），为保证临床级肽的高质量性和结果测定的高可靠性，有必要将这些杂质从活性药物成分中去除。化学合成肽的纯化主要是通过传统的色谱方法进行，RP-HPLC是最常用的方法。此外，快速色谱法（flash）也是研究级肽纯化的通用方法。然而，这两种色谱技术可能会都会忽略共洗脱杂质的存在。相比之下，Gyros Protein Technologies公司的正交纯化PurePep EasyClean（PEC）技术与传统色谱法不同，它基于化学选择性分离原理。首先在固相多肽合成（SPPS）过程最后添加无痕可裂解连接子（PEC-Linker）对全长目标肽进行修饰，而SPPS过程中的封端（Capping）确保了只有全长目标肽可以添加上PEC-linker，然后通过正交捕获和释放技术（catch-and-release）直接将目标肽从复杂的混合物中分离出来。在这个案例中，我们通过使用PEC多肽纯化试剂盒（基础装）纯化组蛋白H3（1-20）肽的极性片段，并且验证了PEC和RP-HPLC的正交性。讨论PEC级肽从图1（左）的色谱图来看，粗组蛋白H3（1-20）看起来似乎很纯净，但是一些缺失序列相应的峰却在质谱图中集中大量出现。其中主要的杂质是丙氨酸（Ala）、精氨酸（Arg）和苏氨酸（Thr）缺失的序列。用0.1％HFBA进行HPLC分析显示出了潜在的峰，并且测定了粗品的纯度为29％。图1（右）显示了PEC纯化肽的色谱图。仔细观察比较质谱图（右侧图1中的插图）发现PEC单次纯化有效地去除了共洗脱杂质，从而确保了分析结果的高可靠性。由于七氟丁酸酐（HFBA）能够将目标肽从截短的序列中分离出来，因此利用HFBA增强的反向快速色谱法（flash）进行首次纯化并与PEC纯化进行比较。采用该方法后，粗品纯度只提高到了66％（表2）。而使用PEC多肽纯化试剂盒纯化之后，纯度达到了86％。利用PEC获得临床级肽接下来，我们利用RP-HPLC进行对上述两种方式纯化的肽进行二次纯化，以获得临床级肽。纯度分别从29％（粗品）提高到了85％和96％（表2）。由此可见，PEC在与RP-HPLC的正交组合纯化肽中表现出了非常优异的纯化效率。节省溶剂消耗色谱分离会消耗大量的有机溶剂，减少溶剂的使用是改善肽纯化生态足迹的关键点。ACN的消耗量是评估正交法生态效益的合理指标。由于PEC的捕捉和释放（catch-and-release）原理，纯化肽只需要使用少量的有机溶剂，并且产生的废物更少。在整个肽纯化过程中，仅积累了50 ml 的ACN和200 ml 的总废料。而快速色谱法（flash）纯化则需要500 ml 的ACN，并且产生总计1500 ml 废料。相比之下，PEC纯化从整体上节省了85％以上的溶剂使用并大量减少废料生成。当考虑结合RP-HPLC进行二次纯化时，额外需要添加1000 ml 的ACN并且总废料生成增加了3000 ml。总体来看，正交PEC纯化与RP-HPLC法结合，可以节省约30％的昂贵溶剂消耗并且大大减少有害废料的产生。结果 1 PEC纯化可以在单个正交纯化步骤中可以有效去除共洗脱截断序列2 正交PEC和RP-HPLC结合获得了具有挑战性的超高纯度的肽3 通过正交PEC纯化，可节省高达85％的溶剂使用并大量减少总废料生成

　　摘要α-黑色素细胞刺激激素（α-MSH）会触发褪黑激素产生，这是人体应对紫外辐射刺激的天然保护措施。皮肤暴露在紫外辐射刺激下会促进α-MSH的产生。因此，在身体受到紫外辐射刺激之前，先刺激褪黑激素的生物合成可预防紫外辐射诱导的皮肤癌症。[1]天然的α-MSH在体内非常不稳定，因此作为治疗剂的α-MSH多是它的类似物。[2-4]其中MT-Ⅱ（图1），作为α-MSH的类似物，是一种环肽，不仅对酶的降解有良好的抗性，并且具有很强的效力。因为MT-Ⅱ的现实意义和大规模生产需求，所以我们的工作重点是优化一种全自动的多肽合成途径，比如多肽序列的线性合成及最终在树脂上作肽的内酰胺化反应。在PurePep® Chorus多肽合成仪上，我们使用不同的肽合成策略全自动合成MT-Ⅱ，以探索最佳合成条件。然后选择其中最优合成方式，利用PurePep® Sonata®+多肽合成仪对MT-Ⅱ进行合成放大。实验结果利用PurePep® Chorus多肽合成仪探索合成条件，在多次合成实验后发现，直接的合成方式并不是合成MT-Ⅱ的最佳选择，因为直接合成过程总是会产生大量的天冬氨酰亚胺(aspartimide)副产物。因此，我们采取分步合成的方式，大大降低了副产物的产生，显著提高MT-Ⅱ粗品的纯度，并且发现其中方法G是最优的合成方式。在优化合成方法后，利用PurePep® Sonata®+中试级多肽合成仪对其进行放大合成，最终在5 mmol的规模下成功合成了MT-Ⅱ。这项工作结合了PurePep® Chorus 和 PurePep® Sonata®+两款多肽合成仪，并且表现出了强大的合成流程开发能力、稳定的合成方法转移放大效果。结论1 在PurePep® Chorus上实现MT-Ⅱ的全自动合成，包括侧链脱保护和树脂上环化2 开发了合成的反应条件（方法G），以优化的耦合条件最大限度减少副反应发生3 该方法被成功转移到PurePep® Sonata®+进行扩大规模合成，并且保持了MT-Ⅱ的高粗品纯度 实验方法与分析首先，通过多肽固相合成（SPPS）法，利用Fmoc/tBu保护方案，使用PurePep® Chorus（0.1 mmol）多肽合成仪多次合成MT-Ⅱ（Ac-Nle-Asp-His-dPhe-Arg-Lys-NH2），并对不同的合成方法进行评估；当合成规模达到5 mmol时，利用新型PurePep Sonata+大规模多肽合成仪继续进行扩大合成。首先室温下利用两种不同的耦合方式（DIC/Oxyama和HCTU/DIPEA）在Rink Amide MBHA树脂（0.35 mmol/g）上合成全长线当量Oxyma Pure；方法B：5当量氨基酸；5当量HBTU；10当量DIPEA】。使用含20%哌啶的DMF溶液脱保护5分钟，重复两次。因为可顺利合成，利用DIC/Oxyama耦合方式再次合成全长线分钟预活化步骤【方法C：5当量氨基酸；5当量DIC；5当量Oxyma Pure；对氨基酸作预活化处理】。在这些合成过程中，Alloc和OAll作为赖氨酸和天冬氨酸的侧链保护基，允许多肽在树脂上环化。最后通过0.2当量的Pd(PPh3)4和24当量的PhSiH混合在DCM溶液中，室温反应60分钟，选择性去除Alloc和OAll，反应后DCM清洗3次。树脂上的环化反应，采用5当量PyOxim和10当量DIPEA的耦合溶液，在DMF中于室温下反应60分钟。但是上述的合成方法都会导致大量的天冬氨酰亚胺(aspartimide)形成。为了抵消这种副反应的发生，我们设计出了一种新的合成路线，采用一种可选择的正交保护基团。在这种新的合成路线中，全长线性MT-Ⅱ通过方法B在Rink Amide MBHA树脂（0.35 mmol/g）上合成两次，两次合成使用两种不同的侧链保护基团的组合，【方法D：Lys（Mtt）/Asp（2-phenylisopropyloxy）】【方法E：Lys（ivDde）/Asp（ODmab）】。从方法D的结果来看，相比于前面所提到的常规方法（方法A、B、C），这种方法可以有效的降低天冬氨酰亚胺(aspartimide)的产生。与此同时，也需要注意的是，这种方法因使用了含特殊保护基的氨基酸相对成本较高。另一方面，方法E结果并不理想，可能还需要更多的探索。为了消除天冬氨酰亚胺(aspartimide)的形成，也为了发现每一步合成发生了什么，所以采用逐步合成的方法。因此，首先使用方法C在Rink Amide MBHA树脂（0.35 mmol/g）上合成0.1 mmol的线性MT-Ⅱ直到合成到组氨酸停止。在完成小试切割和分析之后，将合成树脂分成两份，每份0.05 mmol，然后使用两种不同的耦合方式【方法F：DIC/Oxyama和方法G：HCTU/NMM，5当量的氨基酸、5当量的HCTU、10当量的NMM】将其与天冬氨酸继续耦合，室温反应，并且先进行5分钟的预活化。在这个循环，当使用方法F的DIC/Oxyma耦合方式用于偶联天冬氨酸时会出现天冬氨酰亚胺(aspartimide)，而使用 HCTU/NMM的耦合方式则不会显著出现。为了避免在进一步形成天冬氨酰亚胺(aspartimide)，在该步去除正交保护基团，在树脂上进行环化。两个等分的树脂使用各自的耦合化学反应（方法F:DIC/Oxyma，方法G：HCTU/NMM）继续完成合成。                              PurePep® Chorus对各种方法进行比较，发现通过使用方法G在PurePep® Chorus多肽合成仪上合成MT-Ⅱ时天冬氨酰亚胺(aspartimide) 杂质明显减少。于是选择这种方式在PurePep® Sonata®+大规模多肽合成仪上进行5 mmol MT-Ⅱ的放大合成。再次使用Rink Amide MBHA 树脂（0.35 mmol/g），考虑到相关成本会随着多肽合成规模的扩大而增加，于是应用3倍的过量试剂进行合成，逐步合成分析。在此过程中发现D-Phe和Nle需要重复耦合以便提高偶联效率，这种方法与原先在Chorus上的方法略有调整。合成方法的其他方面保留了一致性，并且取得了非常好的结果。合成完成后，使用DMF和DCM将树脂洗涤，干燥，然后利用TFA/EDT/H2O/TIS（94:2.5:2.5:1）室温切肽1小时，沉淀。将收集的多肽溶于水/乙腈溶液中，使用Shimadzu Prominence HPLC进行收率分析，采用C18，100 ，5 μm，100 × 4.6 mm Kinetex 色谱柱（Phenomenex），流速1 mL/min，流动相A缓冲液使用含0.1%TFA的超纯水，B缓冲液使用含0.1%TFA的乙腈，用5-95%的B缓冲液进行梯度洗脱25分钟，214 nm波长进行检测。分子量分析采用Shimadzu LCMS-2020 Single-Quad质谱仪进行检测，C18，100 ，5 μm，50 × 2.1 mm的色谱柱（Agilent），流速1 ml/min，流动相A缓冲液使用含0.1%甲酸的超纯水，B缓冲液使用含0.1%甲酸的乙腈，用5-95%的B缓冲液进行梯度洗脱20分钟。                                                     PurePep® Sonata®+ 参考文献1. V. V. Ryakhovsky, G. A. Khachiyan, N. F. Kosovova, E. F. Isamiddinova and A. S. Ivanov, Beilstein J. Org. Chem. 2008, 4, 39.2. F. Al-Obeidi, A. M. Castrucci, M. E. Hadley, V. J. Hruby, J. Med. Chem. 1989, 32, 2555–2561.3. F. Al-Obeidi, M. E. Hadley, B. M. Pettitt, V. J. Hruby, J. Am. Chem. Soc. 1991, 111,3413–3416.4. A. Todorovic, J. R. Holder, R. M. Bauzo, J. W. Scott, R. Kavanagh, Z. Abdel-Malek, C. Haskell-Luevano, J. Med. Chem. 2005, 48, 9, 3328–3336.5. D0042170 From Small to Large Scale Optimizing and upscaling the synthesis of melanotan II (MT-II) - Melanocortin Receptor Agonist, on PurePep® Chorus and PurePep® Sonata®+. 普瑞麦迪（北京）实验室技术有限公司是美国GPT公司在中国的全国代理商，提供PurePep Chorus研发级多肽合成仪、Symphony X扩展型多肽合成仪、PurePep Sonata+工业级中试规模多肽合成仪以及PEC (Peptide EasyClean)多肽纯化试剂盒等产品，相信这些一定可以助力您的多肽药物研究。非常欢迎您随时致电咨询，普瑞麦迪将竭诚为您服务。

　　介绍CD36  (白细胞分化抗原36 )是具有多种功能的跨膜蛋白的一部分。在脊椎动物许多细胞类型的表面可发现来源于CD36基因编码的CD36 蛋白。它在脂质摄入、细胞粘附和病原体感知等方面发挥着不同的作用。因此，动脉高血压、糖尿病、心肌病等与这些跨膜蛋白的突变或调节不当有关。                            图一  果蝇触角与纤毛放大示意图尽管这些蛋白质具有重要作用，其功能上的精确机制尚未得到很好的理解。在文献里许多基于体外生化测定的研究发现，这些蛋白质有大量的配体和配体结合区域。在其他研究中,有证据表明配体/CD36 蛋白相互作用可能参与调节配体在膜上的易位和受体介导的配体内化。然而，这些未被发现的 CD36 蛋白生化特性的相关性尚未在其原生环境中得到广泛验证。一个特别受关注的遗传学模型地中海黑腹果蝇已知有14个CD36样的蛋白质，因此提供了一个有用的系统来研究CD36 蛋白质在体内的功能。其中一个果蝇 CD36 家族成员称为感觉神经元膜蛋白1(SNMP1)，表达在嗅觉感知神经元(OSN)中，具有检测脂源信息素的功能。SNMP1通常存在于昆虫的树突状纤毛中，气味受体(ORs，图一) 也位于这里。在OSN中，已知果蝇 SNMP1 的功能是检测雄性信息素(Z)-1-八度乙酸 (cis-vaccenylacetate,  cVA) 。缺乏 SNMP1 时会降低这些神经元对cVA 刺激的敏感性。因此，SNMP1 在此信号通路中起着重要的作用，但其作用机制尚不明确。尽管如此，SNMP1与细胞外脂质配体的相互作用进而引发信号通路下游反应，与哺乳动物 CD36 在脂肪味觉感知、病原性细菌脂质、脂蛋白的免疫识别方面类似1,2。因。